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DiD细胞膜红色荧光染料
产品概述:
DiD细胞膜红色荧光染料
产品编号:DD-10, DD-25
规格: 10mg、25mg
储存条件: -20℃ 避光保存,有效期一年。。
λEx/λEm(MeOH) = 644/663 nm
分子式:C67H103ClN2O3S
分子量:1052.1
产品介绍
DiD 染料是亲脂性荧光染料家族成员之一,它可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当 DiD 与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色,这类染料在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。DiD(远红色荧光)可以用来对活细胞进行成像和流式分析。DiD 可以用 633 nm He–Ne 激光器激发,有着比 DiI(一种常见的细胞荧光染料)更长的激发波长和发射波长,在细胞和组织染色中更有价值。
DiD 染色后可进行Paraformaldehyde(不可使用甲醇等其他试剂)的固定,但不建议在染色后进行透化的过程。此外,在固定透化(室温下用 0.1% TritonX-100 透化)后,也可以很好地进行质膜染色。
使用方法
1. Dil细胞膜染色液制备
(1)配置DMSO或EtOH 储存液:储存液用 DMSO或EtOH配置浓度1~5 mM。
注意:未使用的储存液保存在-20 oC,避免反复冻融。
(2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为1~
5 µM的工作液。
注意:工作液的最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制。可以从推荐浓度的十倍以上寻找最佳条件。
2. 悬浮细胞染色
(1)悬浮细胞密度为 1 × 106/mL加入到工作液中。
(2)在37 ℃培养细胞 2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。
(3)染色细胞试管在1000~1500转离心5分钟。
(4)倾倒上清液,再次缓慢加入预温37℃的培养液。
(5)重复(3),(4)步骤两次以上。
3. 粘壁细胞的染色
(1)使粘壁的细胞在无菌实验室培养。
(2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。
(3)在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
(4)在37 ℃培养细胞 2~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。
(5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,培养5~10分钟,然后吸干培养基。
4. 流式细胞仪的检测
DiD,DiO,DiI,DiR和DiS 染色的细胞可以分别用经典的FL1,FL2,FL3和FL4流式细胞仪检测。
仅供科学研究使用,禁止用于它用.
美国Zeta Life公司成立于1989年,是国际无血清细胞培养基DMEM/F12主要完成人,有三十多年的胎牛血清、无血清细胞培养基、以及干细胞、免疫细胞及肿瘤细胞等多种不同类型哺乳动物细胞的无血清培养液生产经验;也是目前世界胎牛血清、无血清培养基最大的供应商之一;每批血清均有完整的血源证明文件、兽医师检验证明及品质测试报告;
2018年美国Zeta Life公司与美国加利福尼亚大学旧金山校区联合开发全球活细胞、活体动物体转染试剂,此技术成为全球蛋白功能、免疫细胞及干细胞治疗、研发及生产的主要关键技术之一。
引用及参考文献: